1.2药物制备1.2.1白参取已粉碎的白参200克,加70%酒精1600毫升,浸泡、封口、过夜。次日,80℃恒温水浴90分钟。冷却后过滤、滤液移入大烧杯,剩余残渣加入50%酒精1250毫升、80摄氏度恒温水浴60分钟。冷却后再次过滤,将滤液与第一次滤液混合、室温冷却后放置于4℃保有1.2.2发酵白参和细胞因子采购于XX公司的发酵白参、货号XXXXXX,:细胞因子Xx、货号XXXXXX。1.3分组方法按照用药不同分为以下几组:空白对照组给予生理盐水:高浓度白参组:给予Xx浓度自制白参:中浓度白参组:给予Xx浓度自制白参:高浓度发酵白参组:给予Xx浓度购买的发酵白参:中浓度发酵白参组:给予Xx浓度购买的发酵白参:细胞因子对照组:给予Xx浓度细胞因子。1.4实验方法1.4.1溶血空斑实验按照分组方法给药,给药后腹腔注射1:200绵羊红细胞0.5毫升,而后在无菌条件下取出小鼠脾脏,根据文献方法进行溶血空斑实验。1.4.2单核巨噬细胞吞噬实验吞噬实验前4d腹腔注射0.5%淀粉生理盐水溶液0.5m1。实验当天腹腔注射5%鸡红细胞悬液0、5m1,12弘后处死:仰位固定于鼠板上,正中剪开腹壁皮肤,经腹膜注入生理盐水2ml,轻轻按揉鼠腹部1min,然后吸出腹腔洗液1ml,分滴于两片载玻片上,方入垫有湿纱布的搪瓷盒内,移置37℃孵箱温育30min。以生理盐水漂洗,以除去未与载玻片黏附的细胞,晾干。1:1丙酮-甲醇溶液固定5min。4%Giem-sa-磷酸盐缓冲液染色3min,流水冲洗,晾干②。结果判定:油镜下计数巨噬细胞,每片200个按下试计算吞噬百分率和吞噬指数。吞噬指数=(被吞噬的鸡红细胞/200个巨噬细胞)/2:吞噬百分率(%)=[吞噬鸡的巨噬细胞数红细胞/200个巨噬细胞(吞及未吞噬的)]×100%1.4.3NK细胞活力按照分组给药后,处死老鼠、无菌取脾,支撑单细胞悬液后、按照文献报道
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